acridine是什么意思（aciel是什么意思）

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本文目录:

• 1、食道和胃连接地方叫什么，那个字怎么念

• 2、电泳指示剂和染色剂有何区别，各自的作用是什么

• 3、常用防腐剂二十种是什么?

• 4、什么是“组织化学”

一、食道和胃连接地方叫什么，那个字怎么念

食道和胃连接地方叫：贲门（bēn mén）。

贲门位于管状

扩展资料：

贲门组织学特点：

贲门黏膜是由单层柱状上皮和仅由黏液细胞组成的黏液腺体构成。过去大多数人认为贲门黏膜是从出生就存在的正常组织，但近年来越来越多的学者提出CM不是一个自然的结构，而是由食管末端化生形成的，并且可能是食管胃交界部反流性疾病的早期组织学表现。

食管胃交界部主要有3种细胞：黏液细胞、壁细胞和主细胞。贲门腺的黏液细胞所分泌的黏液为中性黏液，用黏液组化染色呈PAS阳性反应，阿尔新蓝(AB，Alciablue)(pH2.5)反应阴性。

鉴定壁细胞的主要方法是荧光探针吖啶橙(AO，Acridineorange)：壁细胞细胞核发黄绿荧光，胞质发红光，而其它细胞的胞质不着色。主细胞以胃蛋白酶原为其标志物采用胃蛋白酶原的抗体和PA-SP双重免疫组化染色。

区别主细胞和壁细胞可以加入甲苯胺蓝和一品红染色剂后在光镜下根据细胞大小、结构、颜色区别：主细胞核经Hem染色后显深蓝色，壁细胞直径较主细胞长，染色后显红色。黏液细胞和主细胞在HE染色和Malory氏染色中都不易区别，可用黏液胭脂红染色或PAS反应染色进行区别。

参考资料：百度百科---贲门

二、电泳指示剂和染色剂有何区别，各自的作用是什么

电泳后,核酸需经染色才能显色出带型,常用以下核酸染色剂： 1、溴化乙锭（ethidium bromide,EB）最常用的核酸荧光染料,可嵌入核酸双链的配对碱基之间,在紫外线激发下,发出桔红色荧光.EB-DNA复合物中的EB发出的荧光,比游离的凝胶中的EB发出的荧光强度大10倍,因此无需洗净背景即可清楚观察核酸带型.若EB背景太深,可将凝胶 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCl2中5min,使非结合的EB褪色,这 样可检查到10ng的DNA样品,EB也可用于检测单链DNA或RNA,但其对单链核酸的亲和力相对较小,荧光产率也相对较低. 在凝胶或电泳缓冲液中加入终浓度为0.5μg/ml的EB,染色可在电泳过程中进行,能随时观察核酸的迁移情况.但EB带正电荷,嵌入碱基后增加了 核酸分子的刚性,使迁移率减慢,故不宜用于测定核酸分子量的大小,这时应在电泳后将凝胶浸入0.5μg/ml的EB水溶液中10min进行染色.EB见光 易分解,应于4℃避光保存, 2、吖啶橙（acridine orange,AO）：吖啶橙可嵌入双链核酸碱基对之间,在254nm紫外线激发下发出530nm的绿色荧光；还通过静电与单链核酸的磷酸基结合,在254nm紫外线激发 下产生640nm的红色荧光.因此可区分单链和双链核酸,灵敏度分别为0.1μg和0.05μg.但吖啶橙的染色操作要求严格,应在 22℃,0.01mol/L磷酸钠缓冲液（pH7.0）中避光浸泡30min,然后在搪瓷盘中用该缓冲剂4℃脱色过夜或22℃脱色1~2小时. 3、银（Ag+）试剂： Ag+与核酸形成稳定复合物,然后用甲醛使Ag+还原成银颗粒.AgNO3等试剂可使聚丙烯酰胺凝胶上的单链,双链DNA及 RNA都染成黑褐色.银染法的灵敏度比EB染色高200倍左右,比亚甲蓝染色高100~1000倍,在小于0.5mm厚的凝胶中,能检测出0.5ng的 RNA,其缺点是专一性不强,能与蛋白质,去污剂反应也产生褐色,而且对DNA的染色定量不准确.银与DNA稳定结合,对DNA有破坏作用,不适于DNA 片段回收的制备. 4、亚甲蓝（methylene blue）可将RNA染成蓝色,但灵敏度不高,而且操作时间长.胶浸泡于0.02%的亚甲蓝,10mmol/L Tris-Ac（pH8.3）,4℃放置1~2h,用净水洗5~8h（反复换水）,带型肉眼可见,最低检测量为 250ng.

三、常用防腐剂二十种是什么?

常用防腐剂有：

苯甲酸钠、

辨析分类：

习惯上，二者常以用途而不是以化学结构相区分，因为同一物质如苯酚(phenol)低浓度时用作防腐剂，较高浓度时用作消毒剂。多数认为，防腐剂一词不适用于全身应用的药物。

常用作防腐剂和消毒剂的药物有苯酚的各种取代物如联苯酚(biphenols)、甲酚(cresols)、二甲苯酚(xylenols)，阳离子表面活性物质，卤素(halogens)，氧化剂如过氧化氢(hydrogen per-oxide)和高锰酸盐(perman-ganates)，苯胺染料(aniline dyes)和吖啶染料(acridine dyes)，重金属盐，醇类(alcohols)和醛类(aldehy-des)等。

防腐剂也应用以保持食品原有品质和营养价值为目的的食品添加剂。规定使用的防腐剂有苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、丙酸钙等25种。

四、什么是“组织化学”

组织化学是指以常用的组织化学技术,对细胞内主要化学成分和活性的粗略(一般性)的研究.

概要介绍如下:

一,______ 核酸(DNA和RNA)

(一)__ 化学特性

1.分布: DNA (细胞核内)

RNA(核仁10% ;细胞质-核糖体90%)

2. 分子结构:戊糖 + 磷酸 + 碱基

特点:① 大量的磷酸基团→酸性

(嗜碱性的基础)

② 戊糖—被盐酸水解→醛基

(成为Feulgen法显示核酸的基础)

② 戊糖—被盐酸水解→醛基 (成为Feulgen法显示核酸的基础)

③ 可以完全水解或部分水解

④ 可以用RNAase或DNAase消化

[ 对照实验(—)]

_

(一)__ 显示方法

1. 福尔根(Feulgen)反应显示DNA

[ 原理 ] 在60℃温度下,将DNA用1N盐酸水解,DNA双链打开成单链,先释出碱基,然后脱氧核糖释出醛基,该醛基与Schiff氏液形成紫红色沉淀.

[ Schiff试剂显色原理 ]

碱性品红 亚硫酸 → 白亚黄酸

(无色试剂,称为Schiff试剂)

[方法]

固定剂的选择可用一般的组织学固定液,常

用Carnoy固定液.

Carnoy固定液:

纯酒: 氯仿: 冰醋酸 = 6:3:1

(60ml) (30ml) (10ml)

恒冷箱切片机的具体染色步骤如下:

⑴ 切片固定在冰醋酸与纯乙醇(1:3 V/V)

中10分钟.

⑵ 由乙醇降至蒸馏水中.

⑶ 用1N盐酸浸泡.

⑷ 放入预热到60℃的1N盐酸中,留6分钟.

⑸ 放入室温的1N盐酸中.

⑹ 放入Schiff液试剂,保持在暗处,60分钟

⑺ 用新配制的SO2水浸洗3次(脱掉未反应

的Schiff液).

⑻ 蒸馏水浸洗净(必须用蒸馏水→洗净无色品红,

否则,残留试剂→有色品红).

⑼ 脱水透明,封固.

结果:核内DNA染为红紫色.

对照:仅改变第4步为1N盐酸,室温15分钟→(-).

[ 注意事项 ]

⑴ 不用醛类固定剂如Bouin,戊二醛,丙烯醛等.

常用Carnoy液,甲醇等.

⑵ 控制水解时间,不同的固定剂用不同的时间,

如:Carnoy 8分钟;Genker 5分钟;

Susa 18分钟 ★ 最适条件应自行试验.

⑶ 控制温度,一般1N盐酸60℃;

如果5N盐酸18～25度.

⑷ 保证Schiff试剂的纯净度.

⑸ SO2要新配制,除去多余的 Schiff液宜用之.

⑹ 必须对照.

2._ 显示核酸的其它方法

⑴ Kurnick甲绿Methylgreen显示DNA法

⑵ 甲绿派若宁Methy green-Pyronin显示DNA和

RNA法

⑶ 菊花青铬明矾(GC)显示核酸法

⑷ 丫啶橙Acridine Orange显示DNA和RNA法

⑸ 核酸提取法

_一,______ 蛋白质(Protein)

_

(一)蛋白质的分子结构

蛋白质的基本单位是氨基酸,肽键将不同的氨基酸结合在一起,除氨基和羧基之外,还含有其它基团,如:—羟基,硫氢基,二硫基等.依其结构特点可分为:酸性氨基酸 和碱性氨基酸 ;芳香族氨基酸:苯丙氨基酸,酪氨基酸;杂环类氨基酸:组氨基酸,色氨基酸,亚氨基酸,脯氨基酸,羟脯氨基酸.

_

(二)目前应用

1._ 用于蛋白质的一般定性

① 确定是否为蛋白质

② 确定蛋白质的酸碱性

③ 显示蛋白质的特殊基团

2._ 用于蛋白质功能定性和定位

_(三)染色方法

目前,研究蛋白质功能定性和定位时多用酶

组织化学法,配体—受体结合法,免疫组化法以

显示特殊的蛋白质.这里仅介绍一般的染色方法.

1.四氮化联邻茴香胺法

(Tetra-azotized-o-anisidine)

[ 应用 ] 广泛应用于显示酶的活性

[ 原理 ] 芳香伯胺与亚硝酸作用,在低温下(<

5℃)可生成重氮盐,此即重氮反应.重氮盐可

与酚类作用生成有色化合物——偶氮化合物.上

述反应必须在酸性条件下进行.

本实验,联邻茴香胺在酸性,低温条件

下与亚硝酸作用生成四氮盐.四氮盐有两个

重氮盐,其中一个重氮基在碱性条件下与所

要显示的组氨酸,色氨酸及酪氨酸的苯环结

合产生偶联反应,另一个重氮基与酚类或奈

类发生偶联反应以增色.因此,可以用生成

的偶氮染料来代表组织细胞的蛋白质含量.

[ 方法 ]

1._ 四氮盐配制

⑴ 天平称取联邻茴香胺0.25g(有毒,通

风橱内进行).

⑵ 在冰浴下,加入已预冷8%盐酸10ml,

玻璃搅拌,促其溶解,混合后为悬浊液.

⑶ 称NaNO2 0.15g溶于1ml蒸馏水中(冰浴

下).

⑷在冰浴下,将配好的NaNO2溶液分三次倒入邻联茴香胺悬浊液内,每次倒入都须玻棒搅动,因产生NO2可有黄烟冒出,至黄烟停止再倒下一次液体.放入冰箱(4℃)内,约20分钟,待溶液变为黄色.

⑸倾出上清液,勿将沉渣泛起,弃去沉渣.

⑹用NaHCO3细粉(约0.5～0.6g)逐渐加

入上清液内,边加边搅拌(冰浴下).

⑺以刚果红试纸测中和点,待试纸不变蓝即达到中和.收集于标本瓶(或广口瓶)内,置冰箱备用.此液不稳定,置冰箱内可保存两周,若变为橘红色则失效.

_

2._ 偶氮反应

—Carnoy固定的大鼠肝,肠等石蜡切片.

⑴ 切片脱蜡至水.

⑵ 将切片放入下列溶液中(在冰浴中至2～3℃),

浸染10分钟.

用前配制:

四氮化联邻茴香胺溶液 4ml

0.1巴比妥缓冲液 (pH9.2) 20ml

24ml

⑶ 入1N盐酸(冰浴中2～3℃)浸洗10秒,多余盐

酸以滤纸吸干.

⑷ 入H酸饱和液,浸染30分钟(冰浴或冰

箱内).

H酸饱和液配制:H酸 0.4g

0.1M巴比妥缓冲液 20ml

(pH9.2) 过滤后使用!

⑸ 蒸馏水冲洗,脱水,透明,封固(树胶)

[ 结果 ]

酪氨酸,组氨酸,色氨酸染成红棕色(+)

※ 0.1M巴比妥钠50ml配制

① 分析天平称巴比妥钠(MW=206.18)

1.0309g

② 于量瓶内+蒸馏水50ml至刻度即可.

0.1M巴比妥缓冲液,pH9.2(20ml)配

制: 0.1M巴比妥钠 19.1ml

0.1N盐酸 0.9 ml

20 ml

2.其它的显示蛋白质的方法

⑴ 米朗反应(Millon Reastion)→显示酪氨

酸的方法

酪氨酸→羟苯基 亚硝酸 →亚硝基苯+Hg→有色物

注:胶原蛋白不显色,其它蛋白质都显色(+)

⑵二硝基氟苯Dinitro—fluoro—benzene (DNFB)法

DNFB与—NH2,SH和酪氨酸产生弱有色反应,

可被偶氮染料加强.

⑶ 酪氨酸重氮化偶联反应

⑷ 蛋白质硫氢基DDD法(固定时避免

氧化剂)

⑸ 铁—铁氰化钾反应显示SH基

⑹ 高甲酸阿尔辛蓝显示SS基法

⑺ 免疫荧光法显示蛋白质

三,碳水化合物

中性多糖——糖原

碳水化合物 酸性多糖——硫酸软骨素 A,B,

C,肝素,硫酸角

(组织中—多糖类) 质素,透明质酸等

蛋白多糖——粘蛋白,唾酸粘蛋白

糖 脂——脑苷脂类

※ 组织中糖的种类较多,因此,要特异性地显示各种

糖类必须用抑制和酶水解来对照实验.

本章仅以高碘酸雪夫法(PAS法)说明之,其它的

方法还有Alcian blue法,甲苯胺蓝异染性染色法等.

高碘酸雪夫法 Periodic—Schiff(PAS)method

[ 原理 ] 高碘酸为强氧化剂,它可以氧化多糖

分子内1,2—乙二醇(顺式和反式)而

产生醛基,此醛基再与Schiff试剂结合即

产生红 紫色.

[ 方法 ] 改良的McManus(1946),高碘酸雪夫法

标本:

① Carnoy固定的大白鼠肝,肾,肠石蜡切片

② 大白鼠肝横冷箱切片(未固定)

[ 步骤 ]

(1) 切片脱蜡入水(横冷箱切片免)

(2) 入0.5%高碘酸水溶液,室温,2～5分钟

(3) 蒸馏水涮洗

(4) 入Schiff试剂,洗3次,每次2分钟

(5) 入SO2水中,洗3次,每次2分钟

(6) 自来水洗5～10分钟

(7) 蒸馏水稍洗

(8)入Mayer氏苏木精副复染核1分钟

(9) 自来水5分钟,换蒸馏水

(10)脱水,透明,封固

[ 结果 ]

PAS(+)→红紫色或红色;核→蓝色

Carnoy固定,糖原原位定位不佳,有

移位现象.

[ 对照 ]

① 用唾液酸淀粉于37℃消化20～30分钟.

② 苯甲酰或乙酰化法作对照(抑制法)

[ 注意事项 ]

①必须按照规定配方配制试剂,按规定的时间 反应.以避免非特异反应.例如:入高碘酸水溶液时间不宜过长,否则非特异着色.

②多糖大多都易溶于水,固定时应避免扩散或移位.

冰冻切片+苦味酸福尔马林→固定→避免扩散或移位.

③注意溶液的pH值:高碘酸液的pH不应超过5.

④注意温度.反应宜在<25℃的室温下进行,否则可氧化醛基为羧酸.

⑤高碘酸溶液的浓度宜控制在0.5%～1%(0.02—0.1M)浓度过高则会发生非特

异反应.

⑥为充分显示多糖中的糖原,可在过碘酸

中加入5%醋酸或纯乙醇固定,但往往有

溶解和扩散.

⑦为阻止胶原纤维和网状纤维阳性反应,

可使用还原液,于使用Schiff液之前.

[ 分析结果 ] PAS反应阳性物质:糖原,中

性粘蛋白,中性唾液性粘蛋白.

四,脂类

[ 组织中的脂类 ]

单纯脂类 脂肪酸

醇的化合物(如:甘油三脂等)

复合脂类 磷脂(卵磷脂,脑磷脂)

脂类 鞘磷脂

糖脂(脑苷脂,神经苷脂)

衍生脂类 胆固醇

肾上腺素

性激素

[ 显示脂类的基本原理 ]

用易溶于脂类的染料,使之溶于所检

的脂质(如脂滴)中,使组织内的脂类着色.

[ 常用方法 ]

苏丹黑B法,油红O法,硫酸尼罗蓝法

[ 基本要求 ]

⑴ 不用石蜡切片.

⑵ 固定剂一般用Formalin保存磷脂较好.

⑶ 方法:

① 物理法:脂溶性染料,不溶于水,属偶

氮染料.常用苏丹Ⅲ,Ⅳ,苏

丹黑 ,油红O等.

② 化学方法:硫酸尼罗蓝显示脂肪酸.

③ 选择性提取法(对照)

实验举例:苏丹黑B法

[ 原理 ]

苏丹黑为偶氮染料,具有脂溶性,可

溶于无水酒精,但不溶于水(常用70%酒

精饱和液).当组织切片入染液时,苏丹

黑B便离开染液而溶于组织内的脂质(如脂

滴中)使组织内脂类着色.

标本:

兔肾上腺和睾丸横冷箱切片,10μm厚,不

固定(或用10%Formalin固定10分钟后水洗).

[ 方法 ]

① 入蒸馏水洗

② 于70%乙醇内涮洗

③ 入苏丹黑B 70%B饱和液,染5～10分钟

④ 于50%酒精内浸洗

⑤ 蒸馏水中洗

⑥ 入Mayer苏木精(复染细胞核)1分钟

⑦ 自来水冲洗5～10分钟

⑧ 入蒸馏水

⑨ 甘油明胶(或Apathy糖胶)封固

[ 结果 ] 细胞内脂滴均呈黑色

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